> blog > Berita Industri

Mengapa kultur sel melisiskan sel darah merah terlebih dahulu?

2022-12-23

Pengenalan dasar
Lisis eritrosit adalah salah satu metode paling sederhana dan mudah untuk menghilangkan sel darah merah, yaitu membelah sel darah merah dengan lisat, yang tidak merusak sel berinti dan dapat menghilangkan sel darah merah sepenuhnya. Pembelahan lisat adalah metode penghilangan sel darah merah ringan, yang terutama digunakan untuk pemisahan dan pemurnian sel jaringan yang didispersikan oleh pencernaan enzim, pemisahan dan pemurnian limfosit, dan penghilangan sel darah merah dalam percobaan protein jaringan dan nukleat ekstraksi asam. Sel-sel jaringan yang diperoleh dengan lisat sel darah merah tidak mengandung sel darah merah, dan selanjutnya dapat digunakan untuk kultur primer, fusi sel, sitometri aliran, pemisahan dan ekstraksi asam nukleat dan protein, dll.

Petunjuk Penggunaan
Sampel sel jaringan
1. Jaringan segar dicerna oleh pankreas/enzim atau kolagenase dan didispersikan ke dalam suspensi sel tunggal, dan supernatan dibuang dengan sentrifugasi.

2. Ambil lisat ELS dari lemari es pada suhu 4, tambahkan lisat ELS ke endapan sel dengan perbandingan 1:3-5 (tambahkan 3-5ml lisat ke dalam 1ml sel yang dipadatkan), tiup perlahan dan campur.

3. Centrifuge pada 800-1000rpm selama 5-8 menit dan buang cairan bening merah bagian atas.

4. Bagian yang mengendap dikumpulkan dan disentrifugasi dengan larutan Hank atau larutan biakan bebas serum sebanyak 2-3 kali.

5, jika cracking belum selesai/lengkap bisa diulang langkah 2 dan 3.

6. Resuspensi sel untuk percobaan selanjutnya; Jika RNA diekstraksi, paling baik melakukannya dalam larutan yang disiapkan dari Langkah 4 menggunakan air DEPC

Sel darah merah memiliki siklus hidup yang sangat singkat, hanya 120 hari, tetapi mereka mereproduksi darah dengan sangat cepat, dan dalam hal ini mereka sangat mampu membelah sel, dan mereka adalah sel yang membelah paling cepat, jadi sel ini sangat berharga, sehingga sangat berguna untuk kultur sel. Sangat sederhana, tidak ada organel di dalamnya, hanya membran sel dan protein.

Sebelumnya:Apa fungsi ELISA kit?

Berikutnya:Persyaratan reagen dan representasi dasar konsentrasi larutan.